“实验的结果也很明显。
各组小鼠肺组织病理学观察各组小鼠肺组织HE染色结果。
结果显示对照组小鼠肺组织呈正常形态,管壁及周围组织无明显炎症细胞浸润,肺泡腔内无渗出物。
模型组小鼠肺组织内结构松散,出现肺泡、间质内中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚,肺泡腔水肿并伴有大量炎性渗出物。与模型组相比,蒲地蓝消炎口服液各组较模型组总体病变程度均有不同程度的减轻。
高剂量组肺泡结构较完整,肺间质渗出、出血及间质的炎性细胞浸润明显减少,肺组织结构接近于对照组的形态。
中、低剂量组相较模型组来讲,肺组织结构和炎性细胞浸润均有所改善。
拜阿司匹林组肺泡炎、间质性肺炎虽没有完全消失,但大部分消退,可见部分炎细胞浸润。
各组小鼠血清中白介素10、恶病质素和核因子kb水平变化与对照组比较,模型组小鼠血清中恶病质素和核因子kb水平明显升高,白介素10水平明显降低。
与模型组相比,各给药组的炎症因子水平均有不同程度的改善,其中蒲地蓝消炎口服液高剂量组最为显著,恶病质素和核因子kb明显降低,白介素10明显升高。”
“有没有数据。”杨光问道。
“当然。”钟医拿出数据。
对照组白介素10是93.04±4.524。恶病质素是111.80±3.378。核因子kb是923.1±29.07。
模型组白介素10是80.19±2.562。恶病质素是151.10±3.441。核因子kb是1106.0±39.97。
蒲地蓝消炎口服液高剂量组白介素10是108.70±4.828。恶病质素是113.20±5.129。核因子kb是886.5±30.47。
蒲地蓝消炎口服液中剂量组白介素10是95.39±3.047。恶病质素是129.30±3.385。核因子kb是973.7±23.32。
蒲地蓝消炎口服液低剂量组白介素10是97.96±2.167。恶病质素是130.60±2.586。核因子kb是961.4±33.49。
拜阿司匹林组白介素10是93.44±2.301。恶病质素是141.50±3.784。核因子kb是987.2±26.73。
钟医拿出了数据交给杨光后。
他也不管杨光是不是在读交出去的数据,他继续说道。
“我们通过GC-MS结合对照品单点对照法测定了糖酵解和三羧酸循环中12种内源性代谢物。
为了获得组间差异信息,采用偏最小二乘判别分析分析对照组、模型组和蒲地蓝消炎口服液高剂量给药组小鼠血清的靶向代谢组学数据,并对获得的偏最小二乘判别分析模型质量进行200次的置换检验,R2和Q2的截距分别为0.0928和-0.229,表明拟合度良好,模型稳定可靠。
从偏最小二乘判别分析得分图中可以看出,模型组和对照组明显分离,给药组位于模型组和对照组之间并偏向对照组,说明蒲地蓝消炎口服液对于肺损伤的能量代谢具有一定的恢复作用。
以偏最小二乘判别分析结合t检验,进一步寻找对照组和模型组之间的差异性代谢物,并以t检验Plt;0.05分析给药后蒲地蓝消炎口服液高剂量组相对模型组的变化趋势。
在糖酵解和三羧酸循环的12个主要内源性代谢物中,对照组与模型组比较,丙酮酸、乳酸、琥珀酸、富马酸、苹果酸、酮戊二酸、顺式乌头酸、3-磷酸甘油酸、柠檬酸、异柠檬酸和葡萄糖存在显著差异。
同时乳酸、琥珀酸、苹果酸、酮戊二酸、异柠檬酸和葡萄糖在蒲地蓝消炎口服液高剂量组中存在显著性回调。”
钟医看在场的人没有人回话。
“所以我们说,蒲地蓝消炎口服液具有清热解毒、抗炎消肿的功效,临床常用于呼吸道感染性疾病的治疗,如咽炎、扁桃体炎、腮腺炎等,但其抗炎机制尚不清晰,需要进一步深入研究。
当然,我们可以讨论炎症反应与能量代谢之间可能存在一定关系,可以通过蒲地蓝消炎口服液对脂多糖诱导的小鼠急性肺炎的干预,探讨其对包括糖酵解途径和三羧酸循环等机体能量代谢的影响。
三羧酸循环和糖酵解是能量代谢的两个重要代谢途径,且三羧酸循环是在好氧生物活细胞中普遍存在的代谢过程,在人类生命活动中发挥着不可替代的作用,是人类活动的基础之一。
糖酵解是所有生物体在葡萄糖分解代谢时必须通过的阶段。
两者都是好氧生物能量合成和细胞代谢中心生化途径的重要环节。
细胞内能量通过腺嘌呤核苷三磷酸转移,腺嘌呤核苷三磷酸的产生与细胞的能量代谢有关,特别是在三羧酸循环和糖酵解中。
我们从结果中能够看出,靶向定量的代谢物中存在乳酸、琥珀酸、苹果酸、酮戊二酸、异柠檬酸和葡萄糖等多个显著性差异代谢物。
乳酸是缺氧状态中细胞代谢的产物,当组织器官低血流量灌注或细胞缺氧时,无氧糖酵解加速,乳酸生成增加,超过肝脏清除能力,从而导致乳酸含量增加。
也能够从结果上看出来,急性肺组织损伤会导致血清中乳酸清除率降低,乳酸含量迅速升高,而在疾病得到有效控制后,体内的乳酸可很快降低。
所以,我们研究中模型组乳酸含量显著性升高,而给药组相对于模型组乳酸含量显著性回调,说明蒲地蓝消炎口服液具有提高乳酸代谢能力,从而保护肺组织的作用。
葡萄糖是肺泡细胞主要的能源物质。
正常情况下,肺泡细胞主要靠葡萄糖有氧代谢获取能量。而缺氧或炎症反应时,肺泡细胞主要靠葡萄糖的无氧酵解获取能量,为了维持肺泡细胞所需的能量,细胞需要摄取大量的葡萄糖。
而琥珀酸、苹果酸、酮戊二酸、异柠檬酸均属于三羧酸循环的重要中间代谢物。
琥珀酸可通过HIF-1α诱导IL-1β炎症信号,为脂多糖诱导的炎症动物模型中重要的代谢标记物。
苹果酸是异常肺呼吸期间,尤其是在低氧或炎症状况下能量代谢改变产生的代谢物。
异柠檬酸与酮戊二酸均是三羧酸循环中重要的中间代谢产物,是连接细胞内碳-氮代谢的关键节点,也是在巨噬细胞中关键的抗炎信号。
所以,在这个研究中,模型组与对照组比较,琥珀酸、苹果酸、酮戊二酸、异柠檬酸的浓度显著性下降,蒲地蓝消炎口服液灌胃给药有效改善小鼠的肺部炎症,并使琥珀酸水平得到较好的恢复。
综上,靶向代谢组学是代谢组学研究的重要组成部分,具有特异性强、检测灵敏度高和定量准确等特点。
靶向研究的三羧酸循环和糖酵解是蒲地蓝消炎口服液干预脂多糖诱导的急性肺损伤的重要代谢通路,乳酸、琥珀酸、苹果酸、酮戊二酸、异柠檬酸和葡萄糖6个代谢物具有显著性差异。
能够得出结论,上述且均与炎症反应存在一定的关联,为在细胞和分子水平深入阐明蒲地蓝消炎口服液抗呼吸系统炎症的作用机制提供了依据。”
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